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貓。不。:CMXR-000002
產品名稱:ChomiX®-Magbeads 抗蛋白酶鏈黴親和素 (prSA) 包被磁珠
ChomiX®-Magbeads 抗蛋白酶鏈黴親和素 (prSA) 包被磁珠採用化學修飾的鏈黴親和素設計,其中賴氨酸和精氨酸殘基被化學密封。這種修飾不會影響珠子與生物素化蛋白質的結合,同時防止胰蛋白酶和 LysC 蛋白酶的酶降解。在基於質譜的蛋白質體學研究中,胰蛋白酶和 LysC 蛋白酶經常用於蛋白質消化。為了避免樣本流失,研究人員直接在負載生物素化蛋白質的鏈黴親和素磁珠系統中進行珠上酵素消化。
然而,這種酵素消化過程也會產生大量的鏈黴親和素衍生勝肽,嚴重干擾後續質譜分析中低豐度勝肽的檢測。
因此,開發ChomiX®-Magbeads抗蛋白酶鏈黴親和素(prSA)包被磁珠可以大大減少這種幹擾,非常適合磁珠負載的生物素化蛋白質的直接酶消化,可廣泛應用於化學蛋白質組學和APEX 和 BioID 等細胞中的蛋白質-蛋白質相互作用實驗。
此珠子濃度為10 mg/ml,粒徑為1.0 μm,具有較高的鏈黴親和素負載量(約50 μg/1mg)和極高的親水性。它們的超順磁性特性保證了快速的磁響應。它們還具有優異的再分散穩定性和磁穩定性,有效確保高蛋白質結合率、低非特異性吸附、反應均勻性和檢測一致性。
磁珠用於從蛋白質組中富集和提取生物素化蛋白質,然後通過高分辨率質譜進行直接磁珠消化和鑑定。與傳統的鏈黴親和素珠 (wtS) 相比,蛋白酶抗性鏈黴親和素珠 (prS) 樣本顯示樣本中幾乎檢測不到含量的鏈黴親和素衍生勝肽(圖 1)。
當應用於 BioID 實驗中辨識 HeLa 細胞中的 SEC61B 交互作用蛋白時,prS 可以辨識 362 種蛋白,整體蛋白訊號強度比 wtS 高約 10 倍(圖 2)。資料來源於文獻(分子系統生物學,2020)。
圖 1:富集 wtS(左)或 prS(右)後樣本中勝肽的基峰色譜圖。
下圖 (XIC) 顯示了由珠上消化的鏈黴親和素產生的三種代表性勝肽 (m / z = 603.3,655.3,1018.0) 的相應強度。
圖 2:透過常規鏈黴親和素 wtS 和 prS 鑑定的 SEC61B 相互作用蛋白的數量和強度。
1.首次使用前,充分渦旋混合,防止改變磁珠濃度。避免長時間超音波,以免損壞磁珠表面。
2. 微珠儲存液含有低濃度小分子抗菌劑,使用前應進行磁分離,並以純水或緩衝液洗滌2-3次。盡快使用珠子以避免長時間存放。
3.4℃保存,使用過程中避免凍融。
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